ВОЛЬГЕМУТА МЕТОД
ВОЛЬГЕМУТА МЕТОД (Wohlgemuth) о п-ределения амилазы, основан на том, что устанавливается предельное количество исследуемого вещества (слюны, крови, мочи, поджелудочного сока и т. д.), которое еще способно при определенных условиях опыта нацело расщепить известное количество крахмала до стадия ахроодекстринов, т. е. до исчезновения реакции с иодом. Вольге-мут предлагает две модификации—получасовую и 24-часовую. В том и другом случаях из испытуемого материала в ряде пробирок готовятся последовательно убывающие разведения таким образом, что во все пробирки помещают по 1
куб. см воды; в первую прибавляют 1
куб. см исследуемой жидкости, перемешивают, переносят 1
куб. см смеси в следующую пробирку, также перемешивают и переносят 1
куб. см в дальнейшую, и так до последней пробирки. Затем, при 24-часовой модификации, прибавляют всюду по 5
куб. см 1%-гюго раствора крахмала, немного толуола и оставляют на сутки в термостате,после чего прибавляют всюдупочтидоверху пробирки водопроводной воды и 0,1 нор-мальн. раствора иода по каплям, до ясной окраски. Отмечают пробирку, в к-рой не появляется характерной для крахмала синей или фиолетовой окраски, а имеется лишь свойственное декстринам красновато-коричневое окрашивание. Амилолитическую силу выражают числом куб. сантиметров 1%-го крахмала, которое может быть в условиях опыта расщеплено 1
куб. см испытуемого материала. Если, напр., предел (исчезновение йодной реакции, т.е. расщепление 5
куб. см раствора крахмала) достигнут в 4-й пробирке, где имелось 0,0625
куб. см исследуемого вещества, то 1
куб. см последнего в состоянии расщепить количество крахмала, соответствующее пропорции: 0,0625:5 = 1: ж, откуда
х =
-^^ = 80. Последняя величина и является мерилом активности фермента и обозначается через D^ji,
гД
е верхний и нижний показатели указывают условия опыта (продолжительность и t°). При получас, постановке, вместо 5
куб.)СМ 1%-ного крахмала, берут 2
куб. см 0,1%-ного, и пробирки для более равномерного нагревания помещают не в термостат, а в водяную баню при 38°. Расчет ведется совершенно аналогично, амилолитическая сила выражается в кубическ. сантиметрах 0,1%-ного крахмала и обозначается символом d
30, . В. м., получивший широкое распространение, следует признать пригодным лишь для весьма грубых, приблизительных определений, т. к. он позволяет учитывать только очень резкие колебания количества или активности фермента (порядка 50— 100%). Более точные результаты дают лишь методы, учитывающие действие амилазы по количеству образующегося сахара.
Лит.: Wohlgemuth J., Uber eine neue Methode zur rruantitativen Bestimmung des diasta-tischen Ferments, Biochemische Zeitschrift, Band IX, 1908; его
те, Fermentmethoden, p. 39, Berlin, 1913.
В. Эигельгардт.
Смотрите также:
- ВОЛЬНОЕ СТОЯНИЕ, положение человеческого тела, характеризующееся 1) большой площадью опоры, так как ноги раздвинуты, и 2) опорой преимущественно па одну ногу. В. с. является наиболее экономным видом стояния вследствие того, 1 ...
- ВОЛЬТ, практическая единица, употребляемая для измерения разностей потенциалов (электр.). 1 В. равняется 108 абсолютных электромагнитных единиц (CGSM) потенциала, или ^'зоо абсолютной электростатической единицы (CGSE). Такова, примерно, разность потенциалов между электродами ...
- ВОЛЬТАИЧЕСКАЯ РЕАКЦИЯ (vertige voltaique), название, введенное в клинич. диагностику Бабинским и объединяющее группу субъективных и объективных явлений, наблюдаемых у человека при раздра-ясении внутр. уха гальванич. током. Если приложить электроды гальванич. батареи к ...
- ВОЛЬТЕРА ЛИЦО, термин, предложенный Марфаном (Marfan) для обозначения выражения лица у грудных детей, находящихся в состоянии тяжелой атрофии. У таких детей лицо представляется несоразмерно маленьким по сравнению с черепом, оно заострено ...
- ВОЛЬФ, Каспар Фридрих (Kaspar Fried-ricn Wolff, 1733—94), один из крупнейших биологов XVIII в. и один из основателей современной эмбриологии. Окончил Меди-ко-хир. академию в Берлине, был учеником Меккеля. В 1759 г. ...