КАМЕРЫ СЧЕТНЫЕ

КАМЕРЫ СЧЕТНЫЕ, приспособление, позволяющее производить подсчет форменных элементов крови и спинномозговой жидкости, бактерий и пр. Все К. с. представляют толстое предметное стекло, посередине которого находится углубление, имеющее во всех своих частях одинаковую глубину— 0,1 мм, в нек-рых К. с.—0,2 мм (см. ниже). На дне этого углубления выгравирована сетка, разделенная на квадратики определенной площади (обычно V^o мм*). Капля исследуемой жидкости, разбавленная соотв. образом, наносится в углубление, и, т. к. объем жидкости над каждым квадратиком точно известен, из числа форменных элементов в одном квадратике легко вычислить их количество в 1 мм³. Одной из наиболее употребительных К. для счета форменных элементов крови является камера Тома-Цейс с а (Thoma-Zeiss). Устройство ее состоит в след.: на предметном стекле приклеена квадратная стеклянная пластинка, имеющая посередине круглое отверстие. В этом отверстии приклеена к предметному стеклу круглая пластинка,' снабженная сеткой (рис. 1). Эта пластинка на 0,1 мм тоньше квадратной пластинки. Т. о. если отверстие в пластинке закрыть покровным стеклом, то расстояние между нижней поверхностью покровного стекла и круглой пластинкой будет равняться 0,1 мм. Между пластинками имеется круглый жолобок, необходимый для того, чтобы излишек жидкости поместился в К. Взаимно перпендикулярные

линии сетки расположены на расстоянии ¹/го^лш°Д^на от другой и образуют так. обр. квадратики площадью в ¹/₄₀₀ лш². Каждая четвертая линия является тройной. Пересечением этих тройных линий образуются поля, содержащие 16 мелких квадратиков. Длина стороны большого квадрата=0,2 мм (V₂₀x4), а площадь=V25 мм*. Всего в этой сетке 16 больших полей. Несовершенство камеры Тома заключается в следующем: наполнение ее кровью производится до наложения предметного стекла. Поэтому К. может или быть не вполне наполненной, и тогда глубина слоя крови будет меньше 0,1 мм, или капля будет выступать из К., и тогда точная пришлифовка покровного стеклышка будет затруднена. Сетка камеры Тома

Рисунок 2.

устроена так, что крупные квадраты неотчетливо отделены от мелких и количество этих полей ограничено. Недостатки самой камеры Тома устранены в камере Бюркера (Burcker), а вместо сетки Тома предложен ряд других сеток. К.Бюркера.В этой К. на предметном стекле (рис. 2) укреплены две продолговатые опорные пластины Б, а между ними приклеены две счетные, снабженные сеткой (рис. 4) пластинки А, к-рые, как и в К. Тома, на 0,1 мм тоньше пластинок Б. Счетные пластинки разделены жолобом, а их округленные наружные концы, как видно из рисунка, выступают за концы пластинок Б. Когда к пластинкам Б плотно притерто покровное стекло, то концы счетных пластинок выступают из-под покровного стекла наружу. Если теперь нанести на этот выступающий конец счетной пластинки каплю разведенной крови, то вследствие капилярности кровь сразу всосется в пространство между покровным стеклом и счетной пластинкой, т.е. точно займет пространство, имеющее 0,1 мм глубины. В этом, а также в возможности производить благодаря наличию как бы двух К. контрольное определение, и заключается большое преимущество К. Бюркера. К. Бюркера бывает снабжена различными сетками, устройство которых видно из рисунка 4.—С етка Тюрка Г" "ГШШШИ ||| Г~ 11 § t^iTullMiiJLi = == |Ц llllilllllllll J Рисунок 3. (Tilrck; рисунок 3) является видоизменением сетки Тома, т. к. ее центральная часть идентична с сеткой Тома; но расходящиеся от этой части крестом полосы снабжены только полями (большими квадратами), а 4 угла этой сетки совершенно идентичны с сеткой ■ Бюркера (в каждом углу по 16 больших квадратов). Общая площадь сетки Тюр-ка=9 дм⁸. Сетка Бюркера (рисунок 4) представляет 9 квадратных полей, образованных пересечением двойных , _Рис ₄ линий. Каждое такое поле содержит 16 больших квадратов, имеющих площадь в Vss ж»⁸, а пересечение двойных линий дает малые квадраты (Vwo-W-w²)- Общая площадь сетки Бюркера=9 мм².— Сетка Предтеченского (рисунок5)разделена взаимно перпендикулярными полосами из 5 параллельных линий с расстоянием между полосами в Vs л**- Расстояние между 5 отдельными линиями, образующими полосу, равно Vao мм. Т. о. пересечение линий дает 16 квадратиков площадью в ¹/_юо мм², а пересечение полос из 5 линий дает поля. Общая площадь этой сети=4 мм^г. ~~Jfl-I fll~~ ^gMjfegjj|=f=% Нусбаумом ~f| ШГЦ ~ If ТГТ" предложена сет- Д^рЛрМ =Лр=||=== ка, отличающая- ТЕ ТГI j I |jij| ~||fl~ IZ ся от сетки Тюрка -JgJLg j =gJE31=== тем, что ее боко- Тг~|Ц~~ГТ""Т| вые части разде- ДЬ~||Ь=1=Н1г^1=== лены не двойны- ЧШ ШГ~* 1ГТ| ми, а одиночными _Ц|_.-||Ц= J ==ffb =§}=== линиями. Видоиз- ТгТ}! ^pF И⁼⁼~ менения всех се- ||| |,|||| 1_[ —Щ-^flfl----- ток имеют целью дать возможность Рисунок 5. счета в возможно большем числе квадратов й наиболее резко отделить большие квадраты от малых. Делается это потрму, что ограничиться счетом форменных элементов в нескольких квадратах нельзя. Объем крови в каждом поле равен V250 л"*⁸ (VsiXVio)- Д^ля счета эритроцитов кровь разводится в 100 или 200 раз.

Рисунок 6.

Для того чтобы узнать число эритроцитов в 1 мм³, надо умножить их число в одном большом квадрате на 25.000 (при разведении в 100 раз) или на 50.000 (при разведении в 200 раз); т. о. ошибка увеличивается во столько же раз. Поэтому необходимо производить подсчет в большем числе квадратов и перечислять на 1 лж⁸ лишь среднее, полученное из большого количества не особенно расходящихся между собой цифр. Так как лейкоцитов в крови по сравнению с эритроцитами очень немного, их счет можно вести только в больших квадратах (полях); отсюда важность удобного для счета расположения больших полей в сетках. Эритроциты всегда считаются во всех 16 малых квадратах. Поэтому удобно, когда малые квадраты собраны в группы, как это имеет место в камерах Тюрка, Предтеченского и Нусбаума. Общие методические указания (см. также Кровь). Кровь для счета форменных элементов необходимо разбавлять, иначе форменные элементы налегают друг на друга; разбавление достигается употреблением смесителя (рис. 6). Нижний конец смесителя вытянут в капи-ляр, на верхний конец надета трубка, через к-рую кровь всасывается до метки. Посередине имеется расширение, внутри к-рого помещен стеклянный шарик. Кровь всасывается до метки 0,5 (посередине капиляра) или до метки 1 и затем сразу разбавляется разводящей жидкостью. Следует осте-- регаться свертывания крови в капиляре. Для счета эритроцитов берут смеситель, объем ампулы к-рого (до метки 101) в 100 раз больше объема капиляра до метки 1, а для счета лейкоцитов—смеситель с ампулой, объем к-рой в 10 раз больше объема капиляра. Т. о. можно брать разбавление в 100 и 200 (если брать кровь до метки 0,5) раз или соответственно для лейкоцитов в 10 и 20 раз. (Окраску лейкоцитов, состав разбавляющих жидкостей и способ взятия крови — см. Кровь.) После смешивания и встряхивания крови с разбавляющей жидкостью из смесителя выдуваются 1—2 капли чистого растворителя, остававшегося в капиляре, и затем капля разбавленной крови переносится на К. с. Покровное стекло и в К. Тома и в К. Бюркера (в последней—предварительно) должно быть идеально притерто к опорной пластинке. Точность притирки узнается по появлению разноцветных, т. н. Ньютоновых колец между покровным стеклом и опорной пластинкой. Подсчет производится, как сказано, в ряде квадратов под микроскопом при среднем увеличении (250). У микроскопов Цейсса удобен объектив С, у Рейхерта—6 Ь, у Лейца — 5. Соответствующие окуляры—3 (Цейсе), 2 (Рей-херт), 2 — 4 (Лейц). Диафрагма микроскопа суживается. Весьма удобен вращающийся столик. Покровные стекла 0,3—0,5 мм.—Т ехника счета. Во избежание повторного сосчитывания одного и того же шарика берут за правило считать те форменные элементы, к-рые лежат на. верхней и левой черте данного квадратика, и не считать тех, которые лежат на его правой и нижней черте. Понятно, что эти элементы будут тогда сосчитаны при счете в квадратике, прилегающем снизу или справа. Перечисление на 1 мм³ происходит следующим образом: если в одном большом квадрате (заключающем в себе 16 малых квадратиков) содержится А эритроцитов, то в 1 мм³их содержится 25.0004 при разведении в 100 раз и 50.000 А при разведении в 200 раз TZTTZS™— -iL^. nPffifff —~₌==_z iiliiSili! (для лейкоцитов соответственно 2.500 А и 5.000J.). Это понятно из того, что объем каждого большого квадрата = Yssd mm^s, a объем малого квадрата равен ¹/₄ооо мм³. Площадь квадратика и глубина К. с. выгравированы на всех К. При счете лейкоцитов во всей камере принимается во внимание общая площадь сетки; так, если во всей камере Бюркера сосчитано JV лейкоцитов, то в 1 mm^s: х = ~~^У-:1°'²⁰~~,так как площадь всей сетки Бюркера = 9 мм'¹, а ее объем = 0,9 мм³; разведение—в 20 раз. В заключение нужно отметить необходимость абсол. чистоты как К., так и смесителя (моются последовательно ВОДОЙ, Спиртом И Эфиром). Г. Копрадя. Кроме оригинальных камер Тома-Цейсса и Бюркера существует ряд их видоизменений, заключающихся гл. обр. в увеличении площади сетки, что важно при счете лейкоцитов.—В и д о -изменения камеры Тома-Цейсса. К. с. Цапперта (Zap-pert; рисунок 7)— площадь сетки в 9 раз больше, чем в камере Тома-Цейсса; каждая сторона прямоугольника равна 3 мм. Сетка представляет в середине сетку Тома-Цейсса, в стороны отходят продолжения этих линий, образуя еще 8 квадратов, равных по величине центральному квадрату. К. с. Эльцголь-ц a (Elzholz)—дальнейшее усовершенствование предыдущей сетки (рис. 8). Угловые квадраты разделены добавочными двойными линиями, чем облегчается счет лейкоцитов. Глубина обеих последних камер — 0,1 мм. Видоизменения камеры Бюркера. К. с. Ключарев а—представляет собой камеру Бюркера с сеткой Предте-ченского (рис. 5). К. с. Г о р я е в а—то же, что и предыдущая, с расширенной сеткой Предтеченско-го.—К. с. Г о р я-ева-Паппен-гейма (Рарреп-heim) представляет собой камеру Бюркера с сеткой Го-ряева - Паппенгей-ма (рис. 9). В этой сетке, напоминающей сетку Предте-ченского, для облегчения счета лейкоцитов уменьшена величина неразделенных нием добавочных линий. больших квадратов, как Рисунок Т. = р = и = = т Ж^^^^ т ^3 ы Рисунок 8. квадратов введе-Общее количество и в сетке Пред-теченского, равняется 100, количество больших квадратов, разделенных на 16 маленьких, уменьшено до 16; количество больших неразделенных квадратов увеличено до 36. Общая площадь сетки и глубина, как в камере Ключарева. Кроме вышеописанных двух основных типов К. с, существуют более усовершенствованные камеры из сплошного стекла, чем уничтожается возможность отклеивания счетной пластинки и изменения вида сетки при подсыхании приклеивающего ее бальзама. К таковым относятся: К. счетная Леви (Levy); сделана из цельного стекла по типу открытой каме-ры Бюркера с одинарной (рис. 10) или двойной -(рис. 11 и 12) сеткой Тюрка (рис. 3) или Нейбауера (Neu-bauer) (рисунок 13). Последняя напоминает сетку Тюрка, но крайние квадраты в ней разделены не двойными, а одинарными линиями. Наполнение камеры производится после наложения покровного стекла; капля всасывается в камеру в силу капилярности, как в камере Бюркера. Общая поверхность сетки—9 мм¹, глубина камеры—0,1 мм.—Сетка Нейбауера очень удобна, употребляется Рисунок 9.

Рисунок 10.

в камерах и других систем. Выпущена фирмами Цейсса и Лейтца.—К. с. Гаусера (Hausser; рис. 14) состоит из двух частей: 1) стеклянной, представляющей предметное стекло с камерой, аналогичной камере Леви, но значительно меньшей величины (рис. 15 и 16), и 2) футляра, в к-рый вкладывается стеклянная часть (рис. 17). Особые зажимы (рисунок 18) фиксируют покровное стекло к

Рисунок п.

предметному. В камере Гаусера применяются сетки Тюрка, Нейбауера и др. Последние две камеры употребляются в Америке. (В каталоге Arthur Thomas C° К» 3300 и 3318.) К. с. для счета форменных элемент тов спинномозговой жидкости. Для этой цели употребляются камеры с большой поверхностью или с большой глу- бипой. К. с. Фукс-Розенталя (Fuchs, Rosenthal) устроена по типу К. с. Тома-Цейсса, отличается большей поверхностью сетки и большей глубиной. Глубина камеры Фукс-Розенталя—0,2 мм, поверхность сетки—16 мм², объем—3,2 мм³. Сетка разделена двойными линиями на 16 больших квадратов (рисунок 19); каждый большой квадрат разделен одинарными линиями на 16 Рисунок 12. малых квадратов. Камера изготовляется фирмой Цейсса.—К. с. Глаубермана (Glaubermann) представляет собой модификацию камеры Фукс-Розенталя, по конструкции близкую к типу камеры Бюркера; площадь сетки увеличена до 25 жи⁸.—К. с. Д у н г е р a (Dunger)—конструкция по типу камеры Тома-Цейсса. Глубина камеры— 0,1 мм, площадь сетки—50 мм^г, объем—• 5 «ж⁸ (рис. 20). Центральная часть сетки состоит из 9 квадратов, анало-гичн. сетке Тюрка; центральная часть окруженадвумя рядами больших квадратов ; наружный ряд состоит из семи больших квадратов (сторона квадрата = 1 мм, почему общая площадь = 49 лш²); для упрощения счета общая площадь сетки доведена до 50 лш² добавлением двух линий вверху и внизу, высотой Vu мм и длиной 7 мм, что составляет недостающий 1 мм². Изготовляется фирмой Цейсса. Центральная часть сетки может быть употреблена для обычных подсчетов элементов крови, сетка в целом—для счета лейкоцитов при значительной лейкопении, для счета форменных элементов спинномозговой жидкости, для счета эозинофилов, тучных Рисунок 13.

Рисунок 14.

клеток и для целей цитодиагностики.—М е -тодические указания для счета форменных элементов спинномозговой жидкости. Для счета в наиболее распространенной камере Фукс-Розенталя употребляются смесители для белых кровяных шариков. До метки 1 насасывается жидкость, служащая для разведения (4—5%-ная уксусная к-та, окрашенная метил-виолетом), до метки 11—спин- номозговая жидкость, чем достигается разведение в Vio ■ Вычисление: если количество форменных элементов во всей камере а, то в 1 мм* будет Х= ^Л5 = ^ > ^что ^без ^осо_бой ошибки заменяется делением полученного при подсчете элементов во всей камере числа на 3. Счет производится с окуляром № 4 и объективом № 5 микроскопа фирмы Рейхерта или соответствующими системами других фирм. К. с. для бактерий. Считать в камере можно только эмульсии однородных бактерий, не образующих кучек, нитей, цепочек и проч.; лучше это делать без всякой Ulllfci."*!'^--:. '-b-^lllllll им - Ifffil ----.-_-=._ - -=-"_ -; г=г_ ==-: 1(№^1,ч-_шш1 Рисунок 15. Рисунок 16. окраски, т. к. осадок краски мешает счету. Для счета можно пользоваться обыкновен-нымикамерами, напр.камерой Тома-Цейсса. Эмульсия бактерий после тщательного встряхивания разводится физиологич. раствором (0,85% NaCl) точно градуированными пипетками (Эрлиха) в 10—20 раз, если густота основной эмульсии приблизительно 1—2

Рисунок 17.

млрд. Из разведенной эмульсии после тщательного встряхивания берется капилярной пипеткой капля и наносится обычным порядком в камеру Тома-Цейсса. Подсчиты-вается не меньше 4 больших квадратов. Зная, что объем большого квадрата=¹/гбо мм³, количество микробных тел в 1 см³ опреде- , ~ п. т. 250.1000 ______ ляется по формуле X =-------------, где q — число сосчитанных больших квадратов, и— число сосчитанных бактерий, m — кратность разведения. Счет производится с наибольшей сухой системой микроскопа ;употребление масляной системы невозможно вследствие толщины покровного стекла и глубины камеры. Глубина обычных камер очень затрудняет счет, т. к. микробы перемещаются вследствие молекулярного движения, располагаются в несколько слоев и долго не оседают. Для уменьшения молекулярного движения рекомендуете^ прибавлять 0,2—0,5% гуммиарабика или

Рисунок 18.

2%-ный раствор пептона.—В последнее время употребляют специальные, более мелкие камеры: К.Тома (Thoma) для бактерий из сплошного стекла; конструкция аналогична камере Леви с одинарной сеткой (рис. 10). Глубина камеры — 0,02 мм, сетка — типа Цапперта (рис. 7). Счет производится только в больших квадратах центральной части сетки, аналогично вышеприведенному. При вычислении количества микробов в 1 мм³ формулу нужно умножить на 5, т. к. объем данной камеры в 5 раз менынеобъемаобы-чной камеры То-ма-Цейсса и объем большого квадрата = Vl250 ММ³.--- Трестера (Тгое- затемненном поле в окуляре. Для Рисунок 19. Счет в счетной камере ster) производится при зрения. Сетка находится каждого объектива нужно при помощи об-ективного микрометра определить величину сторон сетки. Найденное число при данной комбинации линз и данной длине тубуса микроскопа является величиной постоянной. Вычисление производится по формуле N = —^ , где а—длина стороны квадрата сетки в миллиметрах, Т—глубина камеры, и—среднее число микробов п !i= - г 11II Рисунок 20. в 1 квадратике. К. с. Гельбера (Helber) употребляется в конструкции, аналогичной камере Леви (рисунок 11) и камере Гаусера (рис. 14). Глубина камеры—0,02 мм. Сетка Нейбауера (рис. 13). Для камеры рекомендуется употребление особенно тонких покровных стекол—0,18 мм толщины, что дает возможность применять масляную систему. Последнее особенно удобно в камере Гау- сера благодаря фиксации покровного стекла зажимами. Камера выпущена американской фирмой Arthur Thomas Company Philadelphia. В каталоге Laboratory apparatus and reagents под № 3305—камера Гельбера в конструкции камеры Леви; К> 3323—в конструкции камеры Гаусера; покровные стекла—№ 3382. л. Алексина. Лит.: Глаубермав Я., Клиническая гематология, ч. 1, М., 1917; ГоряевН., Исследование и симптоматология болезней крови (Основы клин. диагностики, под ред. А. Левина и Д. Плетнева, М.— Л., 1928); Предтеченский В., Руководство к клинической микроскопии, М., 1924; Klein W., Die Methoden der Keimzahlung (Hndb. d. pathog. Mi-kroorganismen, hrsg. v. W. Kolle, R. Kraus u. P. Uhlen-huth, Jena—Berlin—Wien, B. X, 1929, лит.).

Смотрите также:

КАММЕРЕР Пауль (Paul Kammerer, 1880—1926), известный австр. биолог. Покончил жизнь самоубийством. Учился в Венском ун-те (1899—1904). Работал в Венском биологическом ин-те с самого его основания. С первых же работ К. посвятил ...
КАМНЕДРОБЛЕНИЕ (lithotritia, от греч. lithos—камень и лат. terere—тереть; litho-tripsia, от греч. tribo—тру; lithothrypsia, от греч. thrypto—растираю; litholapaxia, от греч. lapaxis—удаление), операция, при которой при помощи специальных инструментов, камнедробителей (литотрипторов), камни мочевого ...
КАМНЕСЕЧЕНИЕ (lithotomia), операция, которая производится при каменной болезни мочевого пузыря и состоит во вскрытии мочевого пузыря и удалении из него камней. К. является одной из древнейших операций, о которой ...
КАМНИ, см. Конкременты. НАМНИ —ДОБЫЧА, ОБРАБОТКА. Естественные камни, применяемые для различных целей в промышленности и строительном деле, добываются в т. н. каменоломнях, к-рые чаще всего бывают открытыми (работа производится под ...
КАМПЕШЕВОЕ ДЕРЕВО, Lignum campe-ehianum (австрийск. фарм.), получается от Haematoxylon campechianum L., дерева, растущего в Южной и Центр. Америке и культивируемого в Индии и др. местах под тропиками. Относится к семейству бобовых ...